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- 公司名稱 上海劍鈍生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 所在地 上海市
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2017/8/3 15:08:36
- 訪問(wèn)次數(shù) 777
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Western blotting(WB蛋白)是在蛋白質(zhì)凝膠電泳和固相免疫測(cè)定基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù),是將SDS-PAGE電泳分離的蛋白質(zhì)樣本轉(zhuǎn)移到固相載體(硝酸纖維素NC膜,PVDF膜)上,以固相載體上的蛋白質(zhì)作為抗原,與合適的抗體結(jié)合,再與酶標(biāo)記的二抗結(jié)合,經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定及定量的分析技術(shù),其檢測(cè)蛋白質(zhì)的靈敏度為ng級(jí),該技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究領(lǐng)域。
WB蛋白免疫檢測(cè):Western blotting(WB)是在蛋白質(zhì)凝膠電泳和固相免疫測(cè)定基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù),是將SDS-PAGE電泳分離的蛋白質(zhì)樣本轉(zhuǎn)移到固相載體(硝酸纖維素NC膜,PVDF膜)上,以固相載體上的蛋白質(zhì)作為抗原,與合適的抗體結(jié)合,再與酶標(biāo)記的二抗結(jié)合,經(jīng)過(guò)底物顯色或放射自顯影對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定及定量的分析技術(shù),其檢測(cè)蛋白質(zhì)的靈敏度為ng級(jí),該技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)研究領(lǐng)域。
WB蛋白流程:
1、客戶告知實(shí)驗(yàn)分組、編號(hào)、檢測(cè)樣本類型、種屬、指標(biāo)及背景設(shè)計(jì)資料,有具體要求請(qǐng)事先說(shuō)明;
2、簽訂合同,寄送樣本和抗體,如需我方提供抗體請(qǐng)事先說(shuō)明;
3、進(jìn)行實(shí)驗(yàn),提供防偽版實(shí)驗(yàn)結(jié)果,待客戶確定后付清余款,提供原始膠片和實(shí)驗(yàn)報(bào)告;
4、利用軟件測(cè)定目的蛋白與內(nèi)參蛋白條帶的光密度值IOD,計(jì)算目的蛋白相對(duì)表達(dá)量。
客戶注意事項(xiàng)
1、抗體:事先咨詢上?;鶢栴D生物,明確抗體種屬以及是否有該抗體可使用,如無(wú)可由雙方協(xié)商而定,客戶自己購(gòu)買提供或我公司提供;
2、標(biāo)本收集與保存:
組織樣品 新鮮組織放入液氮或-70度保存,組織不少于100mg(約綠豆大小);
培養(yǎng)細(xì)胞 通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)取不少于2000000個(gè)細(xì)胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,混勻后保存于冰箱(-70℃,避免反復(fù)凍融);
血液細(xì)胞標(biāo)本 以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,保存(-70℃可*保存,避免反復(fù)凍融)
血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本 離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可*保存,避免反復(fù)凍融)
3、樣本運(yùn)輸:可選以下任何的一種方式寄送標(biāo)本
組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運(yùn)輸或加入蛋白保護(hù)劑后加冰袋運(yùn)輸;
細(xì)胞樣本也可以直接快件寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染,培養(yǎng)液不漏出,細(xì)胞不要長(zhǎng)得太滿,50%左右,灌滿培養(yǎng)液);
血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保證液體不漏出,視路途遠(yuǎn)近2-3天可到達(dá))。
目前,上海劍鈍生物科技有限公司,主營(yíng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、SCI論文服務(wù)、動(dòng)物模型構(gòu)建、細(xì)胞株、elisa試劑盒等,歡迎廣大科研愛(ài)好者前來(lái)咨詢選購(gòu)!
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