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偽狂犬病毒(PRV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)

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偽狂犬病毒(PRV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)通過大量對比某一種細(xì)菌或病毒的基因,得到該細(xì)菌或病毒共同保守序列,根據(jù)該序列設(shè)計特異性引物,通過PCR擴(kuò)增,即可獲得相應(yīng)大小的片段,以此來檢測該細(xì)菌或者病毒的感染/污染狀態(tài)。

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                                                                                                                                                偽狂犬病毒(PRV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)中含有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)所需要各種試劑組分,如:引物、dNTPs、緩沖液、Taq酶等,PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測樣品,即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷,陽性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶。

規(guī)格: 50T/100T

分類:pcr-熒光試劑盒

儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

偽狂犬病毒(PRV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)產(chǎn)品特點(diǎn):

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;

◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;

◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

需要注意什么:

PCR反應(yīng)液請在冰中配制,然后置于PCR反應(yīng)儀上進(jìn)行PCR反應(yīng)。這種冷啟動法(Cool Start Method)與熱啟動法(Hot Start Method)相結(jié)合,更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應(yīng),增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的特異性,能得到良好的PCR結(jié)果。

PCR的反應(yīng)條件:

因擴(kuò)增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。

◇ 循環(huán)次數(shù)

根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小,設(shè)定25~30個循環(huán)。

如果循環(huán)次數(shù)太少,擴(kuò)增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。

◇ Anneal以及Extension

合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實(shí)驗(yàn)可2℃間隔進(jìn)行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時,容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外,Extension時間太短時,會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear。

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