Lowry法蛋白濃度測定試劑盒-1000微孔
英文名稱：Lowry Protein Assay Kit
規(guī)格：100T(1000微孔)
儲(chǔ)存條件：BSA附件-20℃，其它試劑RT，有效期1年
單位：盒

Lowry法蛋白濃度測定試劑盒-1000微孔

Lowry法蛋白濃度測定試劑盒-1000微孔

Lowry法包括兩步反應(yīng)：第一步是在堿性條件下，蛋白質(zhì)與銅作用生成蛋白質(zhì)-銅絡(luò)合物；第二步是此絡(luò)合物將Folin試劑還原，產(chǎn)生深藍(lán)色，顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。定量范圍為5～500μg/ml蛋白質(zhì)。Folin試劑顯色反應(yīng)由酪丨氨酸、色丨氨酸和半胱丨氨酸引起，因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外，不同蛋白質(zhì)因酪丨氨酸、色丨氨酸含量不同而使顯色強(qiáng)度稍有不同。

        Lowry法測定較為不受脂類物質(zhì)干擾，適于脂類含量較高的樣品測定。也能耐受相當(dāng)濃度的去垢劑如SDS。

操作說明： 

1. 根據(jù)需要量，取適量 Folin 酚甲試劑 A 和 B 按 50:1 混合，混合后有效期為 24 小時(shí)，過期失效。 

2. 根據(jù)需要量，取適量 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品用 PBS 稀釋稀釋 10 倍至濃度 0.5mg/ml。若采用酶標(biāo)儀法(96 孔)

3. 將標(biāo)準(zhǔn)品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到 96 孔板中，加 PBS 補(bǔ)足到 20ul。

4. 將樣品作適當(dāng)稀釋(最好多做幾個(gè)梯度)，加 20ul 到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時(shí)的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)誤差比較大，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線 1/2 后。

5. 將配好的 Folin 酚甲試劑每孔加入 200ul，輕輕震動(dòng)，混勻，室溫放置 10 分鐘。

6. 各孔加入 20 微升 Folin 酚乙試劑，迅速混勻，37℃放置 30 分鐘。用酶標(biāo)儀測定 A650 計(jì)算蛋白濃度。

若采用分光光度計(jì)法（接上述步驟 2） 

3.取八支（或者更多）5ml 離心管，標(biāo)號(hào)，按下表加入試劑。 

4.混勻，37℃放置 30 分鐘。分光光度計(jì)測定 A650 計(jì)算蛋白濃度