低熔點(diǎn)瓊脂糖 細(xì)胞培養(yǎng)
英文名稱
Agarose(Low melting gel)
CAS
9012-36-6
規(guī)格
2.5g ; 5g ; 100g
外觀（性狀）
白色粉末
儲(chǔ)存條件
RT
有效期
4年
單位
瓶
級(jí)別
Biotech Grade

低熔點(diǎn)瓊脂糖   細(xì)胞培養(yǎng)

低熔點(diǎn)瓊脂糖   細(xì)胞培養(yǎng)

正確的加熱方式對(duì)瓊脂糖的充分溶解和凝結(jié)至關(guān)重要，在此，我們提供以下幾點(diǎn)作為正確制備瓊脂糖凝膠的操作參考。 

? 瓊脂糖加熱溶解所需時(shí)間短。 

? 瓊脂糖在 TAE 或者 TBE 緩沖液中不溶解，加熱時(shí)，瓊脂糖顆粒水化形成溶液，水化是時(shí)間依賴的，不同的瓊脂糖水化點(diǎn)不同。瓊脂糖純度高，超微顆粒，非常適合作為電泳實(shí)驗(yàn)載體。對(duì)比于其他的瓊脂糖，瓊脂糖水化速度快，使用者無需煮沸過長(zhǎng)時(shí)間，否則易導(dǎo)致膠液濃稠，不利于混勻，凝膠后易破損。

瓊脂糖凝膠制備 

    用 1×TBE 溶液配制 1%濃度瓊脂糖凝膠

 1. 用于制備膠液的錐形瓶體積應(yīng)為膠液體積的 2-4 倍，緩慢向緩沖液中加入瓊脂糖，邊加邊攪拌，防止瓊脂糖聚集。記錄瓶體和溶液總重量。 

2. 微波爐高火加熱 30s，根據(jù)配制的溶液體積調(diào)整加熱時(shí)間。加熱時(shí)間與微波爐、瓶體大小和瓊脂糖濃度有關(guān)。 

3. 搖勻瓊脂糖溶液。 

4. 再次高火加熱 30s，搖勻瓊脂糖溶液。 

5. 將溶液再次放回微波爐，高火加熱至沸騰（大約 10-35s）。接觸移動(dòng)時(shí)瓊脂糖膠液可能會(huì)劇烈沸騰，小心操作，避免燙傷。從微波爐拿出后，室溫冷卻 1-2min，輕輕搖晃使液體里的氣泡溢出。 

6. 重新放回微波爐，高火加熱，使之沸騰約 15s，觀察瓊脂糖的溶解狀態(tài)，如果仍有顆粒存在，重復(fù)該步驟直至所有晶體全部溶解。 

7. 待瓊脂糖溶解成液體，重新稱量總重量，計(jì)算蒸發(fā)液體量，用水補(bǔ)齊至原始重量，搖勻液體。 

8. 建議膠液冷卻至 50-55℃時(shí)灌膠，有利于凝膠孔徑均勻一致，不至于損傷制膠儀。灌膠前輕輕搖晃瓊脂糖溶液，釋放膠液中殘存的氣泡。 

9. 向制膠槽中灌膠，一般膠的厚度 3-5mm，灌膠后盡量排除梳孔之間或底部的氣泡。 

10. 在室溫放置（30-45min）使膠充分凝結(jié)。