中國(guó)倉(cāng)鼠X 小鼠B 淋巴細(xì)胞雜交瘤MR1 [derivative of HB-11048]細(xì)胞 35.1型號(hào)ATCC上皮細(xì)胞樣貼壁生長(zhǎng)
DMEM-H: Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%消化3-5分鐘。1:3。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。*培養(yǎng)基+8%DMSO公司細(xì)胞的簡(jiǎn)潔信息:
(1)儲(chǔ)存:液氮。
(2)運(yùn)輸:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培養(yǎng)末期液氮凍存。
(5)中國(guó)倉(cāng)鼠X 小鼠B 淋巴細(xì)胞雜交瘤MR1 [derivative of HB-11048]細(xì)胞 35.1型號(hào)ATCC每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
收到中國(guó)倉(cāng)鼠X 小鼠B 淋巴細(xì)胞雜交瘤MR1 [derivative of HB-11048]細(xì)胞 35.1型號(hào)ATCC后的處理:
1)收到細(xì)胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無(wú)縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況,有無(wú)細(xì)胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會(huì)有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個(gè)大離心管中,留一點(diǎn)吹打細(xì)胞沉淀成懸液,回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴(yán)重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補(bǔ)加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積,例如4ml,讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
RS1380 Lec1 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1390 Li-7 人肝癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1400 LLC 小鼠肺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1410 LLC-MK2 恒河猴腎細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1420 LNCaP clone FGC 人前列腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1430 LNCaP clone FGC [LNCaP.FGC] 人前列腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1440 LoVo 人結(jié)腸癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1450 LS 174T 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1460 LTEP-a-2 人肺腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1470 MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 詢價(jià) ATCC
RS1480 MCF 10A 人正常乳腺上皮細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1490 MCF7 [MCF-7] 人乳腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1500 MDA-MB-231 人乳腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1510 MDA-MB-435S 人乳腺導(dǎo)管癌 詢價(jià) ATCC
RS1520 MDA-MB-453 人乳腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1530 MDA-MB-468 人乳腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1540 MDA-MB-468 人乳腺癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1550 MDBK (NBL-1) 牛腎細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1560 MDCK (NBL-2) 狗腎細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1570 MEG-01 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 詢價(jià) ATCC
RS1580 MFC 小鼠胃癌細(xì)胞 詢價(jià) ATCCJ588-100G HEPPS (EPPS) 超純級(jí) 100G 16052-06-5 4 years HEPPS (EPPS)
J588-25G HEPPS (EPPS) 超純級(jí) 25G 16052-06-5 4 years HEPPS (EPPS)
J589-100G MOPSO 超純級(jí) 100G 68399-77-9 4 years MOPSO, FREE ACID
J589-25G MOPSO 超純級(jí) 25G 68399-77-9 MOPSO, FREE ACID
J589-5KG MOPSO 超純級(jí) 5kg MOPSO, FREE ACID
J590-100G POPSO, Na2 超純級(jí) 100G 108321-07-9 4 years POPSO, DISODIUM SALT
J590-25G POPSO, Na2 超純級(jí) 25G 108321-07-9 POPSO, DISODIUM SALT
J591-100G DIPSO 超純級(jí) 100G 68399-80-4 DIPSO
J615-500ML TM 緩沖液 超純級(jí) 500ML N/A TM BUFFER
J616-250ML *溶液 超純級(jí) 250ML N/A 4 years POTASSIUM ACETATE 1.0 M SOLUTION, pH 7.5
J620-100G CAPS, Na 超純級(jí) 100G N/A 4 years CAPS, SODIUM SALT
J620-25G CAPS, Na 超純級(jí) 25G N/A CAPS, SODIUM SALT
J622-1G C12 E9 超純級(jí) 1G 3055-99-0 C12 E9
J623-1KG CAPSO 超純級(jí) 1kg 73463-39-5 CAPSO, FREE ACID
J623-100G CAPSO 超純級(jí) 100G 73463-39-5 CAPSO, FREE ACID
J623-25G CAPSO 超純級(jí) 25G 73463-39-5 CAPSO, FREE ACID
J624-100G AMPSO, Na 超純級(jí) 100G 102029-60-7 4 years AMPSO, SODIUM SALT
J624-25G AMPSO, Na 超純級(jí) 25G 102029-60-7 AMPSO, SODIUM SALT
產(chǎn)品名稱:中國(guó)倉(cāng)鼠X 小鼠B 淋巴細(xì)胞雜交瘤MR1 [derivative of HB-11048]細(xì)胞 35.1型號(hào)ATCC
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
A.中國(guó)倉(cāng)鼠X 小鼠B 淋巴細(xì)胞雜交瘤MR1 [derivative of HB-11048]細(xì)胞 35.1型號(hào)ATCC直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體):
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。