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微生物鑒定藥敏分析儀的原理

   2022年03月29日 13:44  
  微生物鑒定藥敏分析儀是一種能快速進(jìn)行微生物鑒定及其對(duì)藥物敏感性測(cè)試的儀器,用于鑒定各種病原菌,主要是革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌、腸球菌屬及真菌等。
 
  全自動(dòng)微生物鑒定和藥敏分析類儀器結(jié)合自動(dòng)化、微機(jī)化和*的微生物檢驗(yàn)方法,能夠?qū)εR床大多數(shù)細(xì)菌進(jìn)行快速鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)。
 
  細(xì)菌鑒定原理:采用傳統(tǒng)的比色法和快速熒光法。
 
  根據(jù)不同類別細(xì)菌的理化性質(zhì)不同,設(shè)計(jì)不同的測(cè)試卡,每一張卡包括多項(xiàng)生化反應(yīng)。儀器采用光電比色法測(cè)定細(xì)菌因分解底物導(dǎo)致PH值改變或由于細(xì)菌生長(zhǎng)利用底物而引起的透光度變化;其熒光法是在測(cè)試卡的小孔中加入酶底物,使其與細(xì)菌產(chǎn)生的酶結(jié)合生成熒光物質(zhì)。儀器在較短的時(shí)間內(nèi)能夠分析細(xì)菌對(duì)不同生化底物所產(chǎn)生的發(fā)熒光的物質(zhì),通過(guò)讀數(shù)器測(cè)定熒光強(qiáng)度來(lái)判定細(xì)菌胞外酶;采用熒光技術(shù)鑒定細(xì)菌,速度可以提高4- 8倍。兩小時(shí)可提供鑒定報(bào)告。
 
  細(xì)菌鑒定實(shí)驗(yàn)底物有幾種不同類型,各個(gè)不同品牌的儀器均使用自己的測(cè)試卡和相應(yīng)的試劑;以酶為基礎(chǔ)的反應(yīng)底物,包括顯色底物和熒光底物;以微生物生長(zhǎng)為基礎(chǔ)的底物是糖類底物和化合物底物,還有混合底物;通過(guò)與各種細(xì)菌發(fā)生氧化、降解及水解反應(yīng),產(chǎn)生顏色的變化或產(chǎn)生熒光物質(zhì),利用顯色和熒光強(qiáng)度的變化,來(lái)鑒定細(xì)菌的菌型。儀器會(huì)自動(dòng)選擇底物進(jìn)行分析。
 
  藥敏試驗(yàn)也有兩種測(cè)定法: 比濁法和熒光測(cè)定法。
 
  根據(jù)藥敏試驗(yàn)的判讀標(biāo)準(zhǔn),每一種藥物設(shè)計(jì)了多個(gè)稀釋梯度,每一種抗生素測(cè)定極小值抑菌濃度可用3- 8個(gè)測(cè)試孔不等,在卡中加入一定濃度的菌懸液;系統(tǒng)配有專用光電比濁儀,便于測(cè)定由不同細(xì)菌配置菌懸液的濃度。
 
  由于孔內(nèi)微生物生長(zhǎng)會(huì)形成小顆?;蚓奂蓤F(tuán)塊將引起濁度變化,儀器采用光電比濁法測(cè)定各個(gè)測(cè)試孔的濁度變化,每隔一定時(shí)間讀取數(shù)據(jù)一次,讀數(shù)器會(huì)測(cè)得不同的吸光度值,得以獲取待檢菌在不同濃度藥液及不同藥物中的生長(zhǎng)率。
 
  抑菌濃度值(MIC) 極小值的測(cè)定是在含有各種濃度的抗生素的反應(yīng)卡中加入待測(cè)細(xì)菌的菌懸液,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間孵育后,用光電比濁法測(cè)定其透光率,獲取吸光度值,若細(xì)菌生長(zhǎng),濁度增加,吸光度值增大,表示該孔內(nèi)的抗生素不能抑制細(xì)菌,反之表示細(xì)菌被抑制,以最小藥物濃度仍然能夠抑制細(xì)菌的反應(yīng)孔為該種抗生素對(duì)此菌的MIC值。
 
  用熒光技術(shù)測(cè)定時(shí)在肉湯中加入熒光底物,大部分菌種都能在5小時(shí)內(nèi)判讀MIC值,并根據(jù)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告其藥物敏感結(jié)果( S、I、R) 。MIC卡每種藥物均有多個(gè)稀釋度。儀器在每一次讀取數(shù)值后,自動(dòng)將所測(cè)取的數(shù)據(jù)與存儲(chǔ)在硬盤中的菌種資料庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)菌生物模型相比較,由電腦分析得出的結(jié)果做出鑒定,可通過(guò)打印機(jī)打印報(bào)告。
 

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