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溶劑混合時(shí)氣泡的形成會導(dǎo)致液相色譜分析中的許多問題，這些問題可以通過對流動相進(jìn)行脫氣來避免。當(dāng)溶劑混合時(shí)，空氣的溶解度低于同比例的純?nèi)軇^量的空氣會從溶液中析出/冒泡。脫氣是用來描述溶解氣體從溶液中出來的術(shù)語。這種現(xiàn)象也可能發(fā)生在 HPLC 系統(tǒng)中，其中粗糙的表面會產(chǎn)生氣泡形成的成核位點(diǎn)。由于產(chǎn)生死體積，氣泡還可以改變流動相通過色譜柱的流量。在 HPLC 分析中，通過對流動相脫氣，可以在很大程度上避免因氣泡形成而產(chǎn)生的問題。

一、HPLC 系統(tǒng)中的除氣

1.低壓混合：低壓混合系統(tǒng)更容易形成氣泡。用于流動相的溶劑在泵前混合。因此，混合流動相在到達(dá)泵之前處于過飽和狀態(tài)。如果系統(tǒng)經(jīng)歷任何輕微的壓力下降或遇到成核位點(diǎn)，則會促進(jìn)脫氣。如果泵送速率存在波動，則可能會發(fā)生壓降；成核位點(diǎn)可以包括管端和其他非光滑表面。如果流動相脫氣并形成氣泡，則會導(dǎo)致泵送問題，從而導(dǎo)致泵故障。

2.高壓混合：在高壓混合中，每種溶劑都有自己的泵，并且在泵之后進(jìn)行混合。因?yàn)槿軇┦窃诖髿鈮毫ο卤盟偷?，所以泵上不可能發(fā)生脫氣?；旌显诟邏合逻M(jìn)行，任何溶解的氣體都將保留在溶液中，直到壓力下降,這發(fā)生在流動相離開色譜分析柱之后。因此，任何脫氣都發(fā)生在色譜柱之后，但在流動相進(jìn)入檢測器之前。在這種情況下，脫氣會導(dǎo)致檢測錯(cuò)誤，并且色譜圖上會顯示假峰。

二、流動相脫氣

       解決除氣問題的方法是在使用流動相溶劑之前將其脫氣。只需要去除一部分溶解的空氣，使其低于流動相中的過飽和水平。兩種常使用的流動相脫氣方法是：

1.氦氣吹掃：氦氣吹掃可去除高達(dá) 80% 的溶解空氣。對于有機(jī)-水相流動相，用等體積的氦氣吹掃就足夠了。一段時(shí)間后可以降低氦氣的供應(yīng)速率，因?yàn)檫^度吹掃會導(dǎo)致更多揮發(fā)性流動相組分的損失。

2.真空脫氣：將溶劑抽真空，減壓除去60%以上的溶解空氣。

3.超聲處理：超聲波浴作為一種獨(dú)立的技術(shù),只能去除高達(dá) 30% 的溶解空氣。建議將超聲處理與其他技術(shù)之一結(jié)合使用。出于實(shí)際目的，建議在低壓和高壓混合系統(tǒng)中對流動相進(jìn)行脫氣。

       煮沸是去除溶解空氣的一種技術(shù)，但從來不建議這樣做，因?yàn)閾]發(fā)性成分會隨氣體一起損失，而且需要很長時(shí)間才能將流動相平衡到所需的環(huán)境溫度條件。

       今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！