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　　細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)常會(huì)遇到諸如外源污染、真菌污染、支原體污染、操作不當(dāng)?shù)雀鞣N問(wèn)題，為解救細(xì)胞，需要針對(duì)不同問(wèn)題對(duì)癥下藥，那么，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)生細(xì)菌污染該如何解決呢?

　　細(xì)菌是一種原核細(xì)胞微生物，其大小以微米(μm)計(jì)。常見的污染細(xì)菌有革蘭氏陰性菌和大腸桿菌、假單胞菌等，革蘭氏陰性菌中白色葡萄球菌等比較常見。

　　一旦發(fā)生細(xì)菌污染較易發(fā)現(xiàn)，多數(shù)情況下培養(yǎng)液短期內(nèi)顏色變黃，表明有大量酸性物質(zhì)產(chǎn)生，出現(xiàn)明顯混濁現(xiàn)象;有時(shí)靜置的培養(yǎng)液液體初看不混濁，但稍加振蕩，就有很多混濁物漂起。倒置顯微鏡下觀察，可見培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒漂浮。必要時(shí)可取少量培養(yǎng)液涂片染色檢查以證實(shí)細(xì)菌種類;有的培養(yǎng)液改變不明顯而又疑有污染，可取出少量培養(yǎng)液用普通肉湯接種或用未加雙抗藥物的培養(yǎng)液接種，也可取10ml細(xì)胞懸液以100rpm離心5min，沉淀中加入無(wú)抗生素的培養(yǎng)液2ml，置于37℃培養(yǎng)，24h可得結(jié)果。

　　污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡，造成試驗(yàn)失敗和細(xì)胞株(系)丟失。一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞被細(xì)菌污染，需要采取如下解決方案：

　　(1) 丟棄所有已經(jīng)污染的細(xì)胞和培養(yǎng)基;

　　(2) 培養(yǎng)環(huán)境用新潔爾滅擦拭且UV滅菌24小時(shí);

　　(3) 培養(yǎng)試劑中加入P/S雙抗。

　　此外，在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)盡可能使用一次性耗材及成品培養(yǎng)基，以減少細(xì)菌污染的可能性。

　　智立中特(武漢)生物科技有限公司主要致力于質(zhì)粒微生物資源的保護(hù)、共享和持續(xù)利用，圍繞我國(guó)生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展等重大需求，探索、發(fā)現(xiàn)、收集國(guó)內(nèi)外的微生物資源，妥善長(zhǎng)期保存管理;在保證生物安全和保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的前提下，為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供質(zhì)粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。旗下質(zhì)粒載體網(wǎng)是一款提供質(zhì)粒載體展示及定制的專業(yè)型網(wǎng)站，由智立中特(武漢)生物科技有限公司聯(lián)合多家企業(yè)公司科研院校共同打造!主要展示了各種基因類型下的質(zhì)粒載體!

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