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【儀器網(wǎng) 使用手冊】凝膠是凝膠色譜分析的關(guān)鍵,是分離通過色譜柱溶劑中的分子的主要部件。凝膠的處理與選擇決定了凝膠色譜的分離效果,對分析結(jié)果有很大的影響。因此操作人員需要正確裝填凝膠,保證儀器的性能。
凝膠介質(zhì)的預(yù)處理
在使用前凝膠應(yīng)用水充分溶脹(膠:水=1:10),自然溶脹的耗時較長,可采用加熱的方法使溶脹加速,即在沸水浴中將凝膠升溫至沸,1~2h 即可達(dá)到溶脹。在燒杯中將干燥凝膠加水或緩沖液,攪拌,靜置,傾去上層混懸液, 除去上清液中的凝膠碎塊,重復(fù)數(shù)次,直到上清澄清為止。
選擇色譜柱
色譜柱的體積和高徑比與色譜分離效果密切相關(guān),凝膠柱床的體積、柱長和柱的直徑以及柱比的選擇必須根據(jù)樣品的數(shù)量,性質(zhì)和分離目的進(jìn)行確定。
凝膠柱的填裝
凝膠色譜柱與其它色譜方法不同,溶質(zhì)分子與固定相之間沒有力的作用,樣品組分的分離*依賴于他們各自的流速差異。填裝時關(guān)住柱子下口,在柱內(nèi)加入約 1/3 柱床體積的水或緩沖液,然后沿著柱子一側(cè)將緩沖液中的凝膠攪 拌均勻,緩慢并連續(xù)的一次性注入柱內(nèi)。待凝膠沉積約 5 厘米左右時,打開柱子下口,控制流速在 1ml/min。
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