亚洲欧美中文字幕影院,欧美成人激情免费一区,亚洲成AⅤ人在线观看无码,欧美日激情日韩精品嗯

移動(dòng)端

公眾號(hào)
手機(jī)站
廣告招租
您現(xiàn)在的位置:儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>鯉春病毒(SVCV)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法

直播推薦

更多>

企業(yè)動(dòng)態(tài)

更多>

推薦展會(huì)

更多>

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢
鯉春病毒(SVCV)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法
  • 資料類型

    docx
  • 文件大小

    13.8KB
  • 瀏覽次數(shù)

    3927次
  • 上傳時(shí)間

    2020年03月24日
關(guān)鍵詞
鯉春病毒,SVCV,核酸檢測(cè)試劑盒
上傳者
上海一研生物科技有限公司
立即下載

資料簡(jiǎn)介

鯉春病毒(SVCV)核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

 

產(chǎn)品名稱鯉春病毒(SVCV)核酸檢測(cè)試劑盒

48T

電詢

 

【標(biāo)本要求】

人體鼻腔或咽部分泌物:用無(wú)菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或*置入無(wú)菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無(wú)菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。

鯉春病毒(SVCV)核酸檢測(cè)試劑盒【檢驗(yàn)方法】

1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理

用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說(shuō)明書。

或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。

2.試劑配制

取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。

3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽(yáng)性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,*循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。

熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。

樣本采集、存放及運(yùn)輸:

1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可*保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);

3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。

 

鯉春病毒(SVCV)核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:

 

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其他方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
推薦產(chǎn)品
浙公網(wǎng)安備 33010602002722號(hào)
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
淮滨县| 吴忠市| 温宿县| 沛县| 迁安市| 伊金霍洛旗| 高密市| 姚安县| 旺苍县| 马边| 红河县| 姚安县| 高阳县| 封开县| 会泽县| 麻栗坡县| 梁山县| 神木县| 怀集县| 萨嘎县| 安阳县| 龙岩市| 个旧市| 含山县| 陈巴尔虎旗| 新巴尔虎右旗| 长葛市| 吕梁市| 嘉义县| 滦平县| 罗源县| 普兰县| 增城市| 徐汇区| 锡林郭勒盟| 呼和浩特市| 治多县| 岳阳市| 承德县| 奉化市| 四子王旗|